目前,在我國(guó)農(nóng)業(yè)上廣泛使用的殺蟲(chóng)劑,即有機(jī)磷類(lèi)、氨基甲酸酯類(lèi)和擬除蟲(chóng)ju酯類(lèi)農(nóng)藥。其中菊酯類(lèi)農(nóng)藥對(duì)人畜的毒性較低,相對(duì)比較安全;而有機(jī)磷類(lèi)和氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥對(duì)高等動(dòng)物(包括人)的毒性高,易引起人畜急性中毒事故,所以人們普遍關(guān)注的也主要是這兩類(lèi)農(nóng)藥的殘毒問(wèn)題,農(nóng)藥殘留檢測(cè)儀主要用于檢測(cè)有機(jī)磷和氨基甲酸酯兩大類(lèi)農(nóng)藥。
檢測(cè)依據(jù)
《蔬菜中有機(jī)磷和氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥殘留量快速檢測(cè)》(GB/T5009.199-2003)
試劑組成及保存
1、緩沖液:取緩沖溶液試劑1袋倒入試劑瓶中,加蒸餾水(或純凈水)至500mL刻度線,溶解攪拌均勻,備用,室溫保存。
2、顯色劑:向標(biāo)有“顯色劑”的試劑瓶中加入12.5mL的緩沖溶液,溶解,混勻即可,50微升/次。在冰箱中冷藏(0~4℃),切勿冷凍結(jié)冰。
3、底物:向標(biāo)有“底物”的試劑瓶中加入12.5mL蒸餾水,溶解、混勻即可,50微升/次。在冰箱中冷藏(0~4℃),切勿冷凍結(jié)冰。
4、酶試劑:敲開(kāi)玻璃試劑瓶將酶液倒入備用的白色空瓶?jī)?nèi),直接使用,在冰箱中冷藏(0~4℃),切勿冷凍結(jié)冰。
注意:由于瓶蓋中有可能沾染部分試劑粉末,溶解、配置時(shí)應(yīng)注意,不要使這部分試劑粉末損失。試劑盒原包裝不拆封在冰箱中冷藏保質(zhì)期為1年,常溫保質(zhì)期3個(gè)月。
樣品制備
1、擦去果蔬樣品表面泥土,稱(chēng)取1g果蔬樣品(葉菜剪成寬度1厘米左右的菜樣,塊根菜取橫截面樣品)放入燒杯或提取瓶中,加入5mL緩沖溶液,振搖2分鐘。
2、若浸提液澄清無(wú)色或顏色較淺,可直接作為待測(cè)樣液;若浸提液渾濁,則需要過(guò)濾,濾液作為待測(cè)樣液。
3、若浸提液色素干擾,可對(duì)樣品進(jìn)行整株提取。
4、蔥、蒜、辣椒、蘿卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中,含有對(duì)酶有影響的植物次生物質(zhì),容易產(chǎn)生假陽(yáng)性。若需要處理這類(lèi)樣品,可采用整株提取或配套我公司“特別蔬菜樣品前處理試劑盒”進(jìn)行檢測(cè)。具體方法為:
擦去果蔬樣品表面泥土,稱(chēng)取1g果蔬樣品(葉菜剪成寬度1厘米左右的菜樣,塊根菜取橫截面樣品)放入燒杯或提取瓶中,加入5mL緩沖溶液,振搖,靜置2分鐘。將提取液全部倒入另一支10ml離心管,加入2滴試劑A,搖勻沸水浴5min后,取出冷卻,迷你離心機(jī)(6000轉(zhuǎn)/min)離心2min,取2.5ml澄清液,按照樣品測(cè)定進(jìn)行檢測(cè)。
樣品測(cè)定
對(duì)照液測(cè)試:對(duì)照液測(cè)試:取緩沖液2.5mL,酶試劑50微升,顯色劑50微升至5ml離心管中,室溫放置10分鐘或37℃水浴5min,然后加入50微升底物,搖勻后立即轉(zhuǎn)移到比色皿中,及時(shí)放入儀器比色池通道中。(每次開(kāi)機(jī),對(duì)照溶液檢測(cè)只需進(jìn)行一次即可,且必須放入1通道。)
樣品溶液測(cè)試:取待測(cè)樣品液2.5mL,酶試劑50微升,顯色劑50微升至5ml離心管中,室溫放置10分鐘或37℃水浴5min,然后加入50微升底物,搖勻后立即轉(zhuǎn)移到比色皿中,及時(shí)放入儀器比色池中。
注:
(1)儀器每重新開(kāi)軟件一次,第1通道必須放對(duì)照溶液,其他通道可以放樣品溶液,按<調(diào)零>鍵,出檢測(cè)結(jié)果。第二次檢測(cè)時(shí)不需要再放對(duì)照液,每個(gè)通道都可放入樣品溶液,按<檢測(cè)>鍵,出檢測(cè)結(jié)果。
(2)SA系列的儀器,對(duì)照和樣品檢測(cè)都按<檢測(cè)>鍵進(jìn)行檢測(cè),如需要重新做空白可以選擇界面上的“重做”選項(xiàng)。
結(jié)果判定
根據(jù)GB/T5009.199-2003要求,抑制率大于50%時(shí)檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性,小于50%為陰性,對(duì)于陽(yáng)性樣品要有2次以上重復(fù)檢測(cè)。當(dāng)抑制率達(dá)到50%以上,表明被測(cè)樣品的農(nóng)藥殘留可能超過(guò)安全標(biāo)準(zhǔn),請(qǐng)用氣相色譜等仲裁方法確認(rèn)。
農(nóng)藥殘留檢測(cè)儀使用注意事項(xiàng):
1、用于移取試劑或樣品的器具都要,避免交叉污染。
2、試劑使用時(shí),必須遵循只出不進(jìn)原則:從酶試劑、顯色劑、底物試劑瓶中移取出的試劑,不得返回試劑瓶中,以免污染原試劑。
3、使用試劑必須小心,若試劑不慎接觸皮膚,請(qǐng)立即用水清洗。